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本产品是基于同源重组原理开发的一款简单、快速、高效的无缝克隆试剂盒，不依赖繁琐的酶切、连接步骤，可将DNA片段定向克隆至任意载体的任意位点，不受酶切位点限制，可以高效兼容1-5个片段同源重组。2×Ultra Cloning MasterMix中添加了独特的辅助因子及稳定剂，有效提高重组效率，50℃反应5-30min即可进行连接，阳性率达95%以上。经过优化的反应Buffer体系，兼容性更强，提高了复杂体系的克隆成功率。

图a：单片段无缝连接示意图           图b：多片段无缝连接示意图

▪ 快速高效：1-3个片段的连接仅需5-15 min，超过3个片段的连接可以延长至30 min，克隆阳性率高达95%以上。

▪ 操作简便：不受酶切位点的限制，可在任意位点进行克隆，不受平/粘末端的限制。

▪ 无缝连接：插入点不会引入不需要的碱基序列。

▪ 应用广泛：高效克隆50 bp-10 kb片段；也可结合Super pfx高保真酶，应用于定点突变。

如下实验均使用CW3036进行重组反应，CW0808感受态细胞进行转化，CW3339 PCR mix进行菌落PCR。

1.兼容单片段和多片段连接，阳性率高

【实验一】使用CW3036，分别连接5 kb载体和1个，2个，3个不同插入片段，均能获得很好的克隆效果，长斑情况良好，阳性率高达100%。

图1：不同插入片段数量克隆效果

2.长片段克隆效果好

【实验二】分别使用A公司同类产品和CW3036连接5 kb载体和12 kb插入片段，使用CW3036长斑更多，阳性率100%。

图2：与同类产品长片段克隆效果对比

3. 稳定性好

【实验三】将CW3036在室温或37℃放置7天进行热稳定性测试，以及将其反复冻融30次进行冻融稳定性测试，与对照组相比，克隆效果不变。

图3.1：热稳定性测试

图3.2：冻融稳定性测试